自噬在由烟曲霉菌感染的真菌性角膜炎的天然免疫反应中的作用

• 目的：
  • 确定自噬现象在曲霉感染引起的真菌性角膜炎中的天然免疫反应中的作用。
• 方法：
  • 通过透射电子显微镜（TEM）观察从FK患者和FK小鼠获得的角膜样品
  • 通过WesternBlot检测烟曲霉菌感染的C57BL/6小鼠角膜中自噬相关蛋白LC3B-II、Beclin-1、LAMP-1和p62的表达情况
  • 用自噬抑制剂3-MA、氯喹（CQ）或诱导剂雷帕霉素处理后，通过Western Blot检测自噬相关蛋白。
  • 在裂隙灯下观察角膜并拍照，而后，用苏木精和曙红染色观察其病理变化
  • 通过免疫荧光染色标记并分析中性粒细胞，并在TEM下观察
  • 通过泥RT-PCR和Western Blot 检测CXCL-1、IL-1β、HMGB-1、IL-18、TNF-α和IL-10的水平
  • 检测并照相真菌负荷的定量。
• 结果：
  • TEM观察显示无论是患者还是小鼠角膜组织中都有自噬体累积
  • 真菌感染后，角膜中LC3B-II、Beclin-1和LAMP-1的表达升高，而p62降低。
  • 3-MA或CQ治疗和上调临床评分、病理变化以及除IL-10以外的CXCL-1、IL-1β、HMGB1、IL-18和TNF-α的表达
  • 在用3-MA或CQ处理的角膜中，PMN的形态发生了变化，PMN募集增加，而雷帕霉素则减少了对角膜炎的炎症反应
  • 上述结果具有统计学意义。
• 结论：
  • 烟曲霉感染增加了角膜自噬的表达。
  • 自噬在对烟曲酶性角膜炎的固有免疫反应中其抗炎作用
• PMID: 32084267