肿瘤产生的CXCR1和CXCR2趋化因子受体激动剂诱导NETs从而干扰免疫细胞毒性

• 中性粒细胞在携带有肿瘤的宿主体内会大量的扩增和累积。
• 在癌症患者的肿瘤产生的CXCR1和CXCR2趋化因子受体激动剂和其他趋化因子的影响下，中性粒细胞和髓系粒细胞来源的抑制细胞（granulocytic Myloid-derived suppressor cells， MDSCs）产生NETs
• 本文发现癌症产生的CXCR1和CXCR2激动剂是促进NETosis的主要介体。
• NET包裹肿瘤细胞，并屏蔽外周的由CD8+T细胞和NK细胞介导细胞毒性，这种屏蔽功能主要通过阻止肿瘤细胞和周围的免疫细胞及靶细胞之间的接触实现。
• NETs保护肿瘤细胞免受细胞毒性是小鼠成功癌症转移的基础，而PAD4（精氨酸脱亚氨酶4，Protein Arginine Deiminase）抑制剂的免疫协同治疗作用可以通过免疫检查点抑制剂抑制NETosis
• 活体显微镜检查提供了中性粒细胞NET干扰溶细胞性细胞毒性T淋巴细胞和NK细胞与中立细胞接触的证据
• 文献来源：
  • PMID: 32289253

展开的蛋白反应介体PERK通过抑制STING信号传导来控制肿瘤细胞中的髓样细胞驱动的免疫抑制

• 在渗透到肿瘤中时，支持髓样细胞的免疫调节极化的主要机制仍在很大程度上未被探索。
• 这些信号的阐明可以使更好的策略来恢复保护性抗肿瘤免疫力
• 在本文中，研究人员调查了内源性激活的RKP样内质网激酶（PKR-like endoplasmic reticulum kinase， PERK）在肿瘤相关的髓样细胞来源的抑制细胞（tumor-associated myeloid-derived suppressor cells, tumor-MDSCs）的免疫抑制中的作用
• PERK信号在tumor-MDSCs中表达增加，其缺失将MDSC转变为激活CD8+T细胞介导的抗肿瘤免疫的髓样细胞。
• 缺乏PERK的肿瘤MDSCs破坏了NRF2驱动的抗氧化能力并或坏了线粒体呼吸稳态。
• 此外，在PERK缺陷性MDSC中减少的NRF2信号转导淫妻胞质线粒体DNA升高，并因此导致抗I型干扰素STING依赖性表达。
• NRF2信号的重新激活，STING的条件缺失或I型干扰素受体I的阻滞恢复了PERK切除的MDSC的免疫抑制潜能。
• 本文的发现证明了PERK在tumor-MDSC功能中的关键作用，并揭示了重新编程免疫移植性骨髓生成以增强癌症免疫疗法的策略。
• 文献来源：
  • PMID: 32294407

覆盖网膜脂肪相关淋巴样簇的基质细胞触发中性粒细胞聚集体的形成以捕获腹膜污染物

• 大网膜是一种内脏脂肪组织，富含脂肪相关的淋巴样簇（Fat-associated lymphoid clusters， FALCs），可收集腹膜污染物并在腹部提供第一层免疫防御。
• 在本文中，研究人员调查了腹膜炎期间介导腹膜污染物捕获的机制。
• 网膜基质细胞的单细胞RNA-seq和空间分析现实，FALCs的表面被CXCL1+间皮细胞覆盖，研究人员将这些细胞成为FALC覆盖细胞。
• 在酵母聚糖诱导的腹膜炎期间，CXCL1的阻滞剂抑制了中性粒细胞在FALCs的募集和聚集。
• 蛋白精氨酸脱亚氨酶4，是一种NETs释放中非常重要的酶。抑制蛋白精氨酸脱亚氨酶4，可以消除中性粒细胞聚集和网膜FALC捕获腹膜污染物。
  如何抑制这个所谓的"蛋白精氨酸脱亚氨酶4"，可否用于真菌性角膜炎？
• 对急性阑尾炎患者网膜样品的分析证实了中性粒细胞的募集和FALC处的细菌捕获是通过上述原理。
• 因此，专门的网膜间皮细胞协调中性粒细胞的募集和聚集以捕获腹膜污染物
• 文献来源：
  • PMID: 32294409

“赢得”孩子

• 赢得合作的四个步骤
  • 表达初对孩子感受的理解
  • 表达出你对孩子的同情，但不是宽恕
  • 告诉孩子你的感受
  • 让孩子关注于解决问题
    • 如果孩子没有想法，你可以提出一些建议，知道你们达成了共识
• 这四个步骤的根本：友善、关心和尊重

自尊：一个容易造成错觉的概念

• 孩子不能认为自己的自尊取决于外在的他人的评价
  • 如果出现这种情况，孩子可能就会变成"讨好者"或"总是寻求别人的认可"
  • 他们学会了观察别人的反应来判断自己行为的对错，而不是学会自我评价和内省
  • 他们培养出来的是"他尊"，而不是"自尊"
  • "给孩子自尊"运动
• 我们能为孩子做的最有益的事情，就是教孩子学会自我评价，而不是让他们依赖于别人的赞扬或观点。
  • 面对孩子的错误
    • 大人应该教会孩子把犯错误当成学习的大好时机
    • 通过允许孩子经历失败，他们就能够在问题出现时学会怎样去解决
    • 让孩子学会适应（失败）将使他们受益无穷，这样才能使他们知道如何应付生活中的跌宕起伏。
  • 让孩子有大量机会在家里、学校和社区作出有意义的贡献，孩子就会受益良多。归属该和自我价值感是其中的关键。

随着近视度数增加，前巩膜变薄

• 目的：
  • 考虑到视力扩展是伴随巩膜变薄的，本研究调查了在正视和近期情况下，不同子午线上的巩膜厚度（前巩膜厚度[AST]和后巩膜厚度[PST]）的变化。
• 方法：
  • 总共有95名参与者（平均年龄：24±4岁）接受了眼部成像，包括正视眼（等效屈光度：±0.75D，n=20）和近视眼（-1.00~27.25D，n=75）
  • 扫描光学相干断层扫描
  • 使用半自动化的定制设计软件分析所有图像，以1mm为间隔确定巩膜厚度
  • 沿水平和垂直子午线，从角膜缘到5mm（n=95）估计PST，从中央凹到5mm（n=25，仅仅高度近视）PST。
• 结果：
  • 中值球面等效屈光不正和轴向长度分别为-4.25 D（IQR，-12.50至-1.00 D）和25 mm（IQR，23.72-28.35 mm）。
  • 前巩膜在上半部最薄，在下半部最厚（475.3±19.0 vs. 605.9±18.6 µm； P <0.001）。
  • 随着近视程度的增加，单独的下位AST显着降低（r = 0.27; P = 0.008）。
  • 鼻和颞经之间的AST没有差异（583.24±15.00 vs. 587.09±27.00 µm； P> 0.05）。
  • 高近视子集的平均中央凹下PST为251.7±12.0 µm，比所有子午线上的平均AST薄45％以上。
  • 中央凹周围平均巩膜厚度（1-5 mm）沿不同子午线相似（P> 0.05）。
• 结论：
  • 与其他三个子午线相比，随着近视程度的增加，沿着下子午线的前巩膜变薄相对明显，这表明AST的潜在作用，尤其是在下子午线中，可作为近视进展的标志
• 文献来源：
  • PMID: 32271887

在兔巩膜中基于二次谐评估用于近视的治疗性组织交联

• 目的：
  • Second harmonic generation signals (SHG) are emitted preferentially from collagenous tissue structures and have been used to evaluate photochemically-induced (CXL) crosslinking changes in the cornea.
  • Since therapeutic tissue crosslinking (TXL) using sodium hydroxymethylglycinate (SMG) of the sclera is a potential treatment for high myopia, we explored the use of SHG microscopy to evaluate the effects.
• 方法：
  • 在尸体兔头右眼的赤道12点位置（n=16）使用SMG（40-400mM）进行单次Tenon（ST）注射（400μL）
  • 3.5h后，使用860nm双光子激发400-450nm发射进行共聚焦显微镜（CM）扫描。
    • 图像的收集、处理和分析在哥伦比亚大学赫伯特·欧文综合癌症中心（Herbert Irving Comprehensive Cancer Center at Columbia University）的共聚焦和专用显微镜共享资源平台上进行。
    • 作为一种方法学上的对照，测量含有SMG和5-磷酸核黄素的溶液的SHG信号伪影以及浸泡然后从核黄素溶液中洗净巩膜组织（浸泡转移后洗涤2、3、5分钟）
    • 将组织按照外巩膜朝下的方向放置在圆形盖玻片上（厚度# 1.5，直径25mm；Warner Instruments, Hamden, CT, USA），安装在封闭的金属腔室中（AttoFluor细胞腔，Molecular Probes，Eugene，OR，美国）
    • 对于成像，我们在配备有Nikon 25x/ NA1.1 Apo LWD水浸物镜的Eclipse Ti显微镜支架（Nikon Instruments， Melville，NY，美国）上使用了Nikon A1R-MP激光扫描系统
    • 用Chanmeon Vision II可调激光器（Coherent，USA）的860nm激光器激发SHG信号，并在700nm激发样品进行自发荧光成像。
    • 使用400-450nm带通滤光片，使用费反扫描检测器检测背向散射SHG发射以及自发荧光。
    • 860nm处的激光功率为60mW（占总功率的2.5%），而80MHz处的激光脉冲宽度为140fs
    • 像素停留时间为6.2、3、10-9s/像素
    • 图像分辨率为1024像素/线
    • 使用NIS Elements软件（Version 4.3，Nikon）自动完成图像捕获
    • 通过使用显微镜扫描组织（预览）并捕获组织在整个图像视野中的可视化且不重叠的组织来选择捕获图像的区域
    • 对于浓度依赖性的比较研究，将每个图像上的深度调整为距图像约10-15 lm
    • 巩膜上层盖玻片还被用于"三明治"方法，以最大程度地减少组织不规则性，例如"褶皱或皱纹"，如果存在不同深度，则可以在图像上形成明显较暗的区域。
  • 对图形进行像素密度和纤维束"波纹度"分析。
    • 图片分析使用Fiji软件
    • 通过绘制直方图并取其平均值，从每个图像中获得像素密度，作为信号亮度的反应。
    • 然后检查了处理样品和对照样品之间的平均像素密度值的差异
    • 另外，使用从心血管文献采用的方法对波纹度进行了分析，该方法使用Fiji软件的Neuron J插件
    • 端到端的纤维长度基于鼠标控制的绘图工具获取，其中包含单个焦平面的图像
    • 然后测量距被追踪纤维的每一端的直线距离，并将其表示为线性距离
    • 再此基础上定义波纹度%：波纹度%=（波纹度[SMG]-1）/（波纹度[Control]-1），其中，波纹度[] = 长度[曲线]/长度[线性]
    • 在分析的重复上，每个独立样品，每个交联至少拍摄10张图像进行分析。
    • 每张图像内进行10次纤维测量，并针对没中交联条件评估10个图像
    • 对于每个图像，首先将10个光纤测量值平均。
    • 然后将10张图像的值取平均值，进行统计分析。
    • SHG测试的样图
      
  • 使用热变性（Tm）温度确认交联作用。
• 结果：
  • 治疗性组织交联定位研究表明，交联变化发生在注射部位和相邻部位。
  • 二次谐波产生信号揭示了大的纤维状胶原 束状结构，显示出不同程度的起伏。
  • 直方图显示400nM SMG中的信号增加超过40mM的6倍。
  • 这相当于400nM的δTM=13摄氏度，而40mM的δTm=4摄氏度
  • 波纹密度分析表明，由于SMG CXL，纤维直度增加
• 结论：
  • 通过SMG巩膜组织交联改变了二次谐波产生信号强度和纤维束波纹度。
  • 这些变化提供了对由治疗性交联技术引起的大分子变化的见解，并且可以提供一种评估由巩膜交联疗法引起的结缔组织蛋白变化的方法
• 文献来源：
  • doi:https://doi.org/10.1167/iovs.16-20241