慢性束缚应激通过β-肾上腺素和糖皮质激素信号错位角膜生物钟

目的：确定慢性束缚应激（RS）——一种经过炎症的慢性心理应激模型——是否破坏角膜昼夜转录组并改变上皮、神经、免疫和代谢输出，并区分β-肾上腺素能信号和糖皮质激素信号的相对贡献。

方法：

• 雄性C57BL/6J小鼠在ZT3（Zeitgeber Time 3）每天接受2小时束缚应激，连续14天。

• 各组分别接受普萘洛尔（propranolol）、美替拉酮（metyrapone）或无干预；肺应激同窝小鼠作为对照。

• 通过血浆促肾上腺皮质激素、皮质酮、肾上腺素和去甲肾上腺素水平，以及颈上神经节和肾上腺基因表达，确认全身应激激活。

• 在24小时周期内每3小时采集一次整角膜（ZT0-ZT21），进行Bulk RNA测序。使用JTK_CYCLE鉴定节律转录本；使用DEseq2进行差异基因筛选。

• 评估上皮有丝分裂、免疫细胞技术、ZO-1/occludin表达、亚基底神经结构以及Cochet-Bonnet角膜敏感性。

结果：

• RS引起节律基因广泛的相位提前和振幅减弱，下游重编程免疫、增殖和代谢通路。

• 表型上，RS增加角膜机械敏感性，降低中性粒细胞和γδT细胞计数，提高上皮有丝分裂，降低ZO-1/occludin表达，而亚基底神经长度未受影响。

• 普萘洛尔部分恢复昼夜相位对齐并改善上皮和代谢参数；美替拉酮优先增强了免疫相关基因及免疫细胞丰度。

结论：RS通过β-肾上腺素能和糖皮质激素机制破坏昼夜输出并损害上皮、免疫和代谢稳态。时间靶向这些神经内分泌通路可能成为环境应激诱导眼表功能障碍的策略。

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/41400316/