多巴胺受体1治疗通过抑制NOD样受体蛋白3相关炎症促进角膜损伤的上皮修复

• 作者：Jianmin Hu，福建医科大学
  
• 目的：
  
  • 阐明多巴胺受体1（DRD1）对炎症条件下小鼠角膜上皮细胞（MCEC）增殖的影响。
    
• 方法：
  
  • 在体外，用IL-1β（含或不含pcDNA3.1_DRD1）处理永生化的MCEC（iMCEC）。
    
  • 原代MCED（pMCEC）暴露与IL-1β，有或没有DRD1激动剂（A68930）。
    
  • 使用CCK-8测量Ki-67和p63免疫染色与细胞增殖进行定量。
    
  • 评估NOD样受体蛋白3（NLRP3）、IL-1β和IL-6的表达水平。
    
  • 建立小鼠角膜损伤模型，2mm浅表角膜切除术。
    
  • 受伤后最多5天，每天的对受伤的眼睛局部施用3次0.1% A68930或PBS
    
  • 免疫荧光分析角膜中Ki-67、p63和CD45的表达
    
  • 利用蛋白质印迹和实时定量PCR对小鼠角膜中的DRD1、NLRP3、IL-1β和IL-6进行定量分析。
    
  • 在损伤后长达5天的时间内通过荧光素钠染色监测角膜上皮再生。
    
• 结果：
  
  • 体外过表达DRD1和A68930可促进MCED增殖并抑制NLRP3和IL-1β和IL-6的表达。
    
  • 与PBS治疗相比，小鼠机械性角膜损伤后局部应用1% A68930导致Ki-67和p63表达增加。
    
  • 此外，局部施用0.1% A68930降低了CD45、NLRP3和IL-1β和IL-6的表达。
    
  • 荧光素钠分析表明0.1% A68930治疗组角膜上皮再生加速
    
• 结论：
  
  • DRD1治疗可抵消NLPR3相关炎症并促进角膜损伤的上皮修复
    
• Hsiou：
  
  • 角膜受伤后的DRD1如何表达？
    
  • DRD1是表达在角膜上皮细胞？