跨膜蛋白CMTM6减轻实验性干眼症的眼部炎症反应并改善角膜上皮屏障功能

作者：Hong Qi，北京大学

目的

探讨跨膜蛋白CMTM6对干眼病（Dry EYE Disese，DED）发病机制的影响并阐明其潜在机制

方法

1. 通过数据分析、qRT-PCR、Western Bloting和免疫组化证实CMTM6的表达。
2. 使用酚红线测试检测泪液分泌。
3. 通过流式细胞术评估免疫细胞浸润。
4. 通过荧光素钠染色、闭锁带1（Zonula Occludens 1， ZO-1）免疫荧光染色和细胞-基质阻断抗感染（ECIS）评估来评估屏障功能。
5. 采用siRNA和shRNA沉默CMTM6，慢病毒介导CMTM6过表达。
6. 通过qRT-PCR和细胞技术珠阵列（Cytometric bead array，CBA）分析来分析促炎细胞因子水平。

结果

1. CMTM6在健康人和小鼠角膜和结膜上皮中表现出高表达，但在DED中显著降低。并且其下调和疾病严重程度相关
2. *Cmtm* ^-/-  干眼小鼠表现出泪液分泌减少、角膜上皮严重缺损、结膜杯状细胞密度降低和炎症反应上调。*Cmtm* ^-/-  干眼小鼠和CMTM6人角膜上皮细胞转化（Human corneal epithelia cell-transformed， HCE-T）细胞表现出更严重的屏障破坏和ZO-1表达减少。
3. HEC-T细胞中CMTM6敲低增加了高渗应急诱导的炎症反应，而CMTM6过表达可显著减轻这种炎症反应。
4. 沉默CMTM6后，高渗刺激的HCE-T细胞中磷酸化p64的水平增加。NF-κB p65抑制JSH-23可逆转CMTM6敲低HCE-T细胞中高渗透压引起的过度炎症反应。

结论

眼表CMTM6表达减少有助于DED的发病，CMTM6-NF-κB p65信号通路可能作为DED的一个有前景的治疗靶点。