2022年9月1日星期四

一组脉络膜基质细胞合成维甲酸

  • 奥地利萨尔茨堡帕拉塞尔苏斯医科大学解剖学和细胞生物学系的Falk Schroedl 带领的团队对对雏鸡近视后atRA的来源进行了研究。
  • 脉络膜全反式维甲酸(atRA)可能通过调节巩膜细胞外基质的合成进而在控制多种脊椎动物出声眼睛生长的中发挥关键作用,因此可能在近视的发展中发挥关键作用。
  • 在小鸡眼睛中,脉络膜atRA的合成完全受其合成酶视黄醛脱氢酶2(RALDH2)的调节
  • 在小鸡和人类中,RALDH2已在迄今为止未鉴定的脉络膜细胞群中检测到。
  • 因此,本研究的目的是确定脉络膜中的RALDH2+细胞类型,并确定这些细胞在视觉引导的眼睛生长期间如何调节atRA浓度。
  • 小鸡在一只眼睛上佩戴半透明护目镜10天,在取下护目镜后第0、1、4、7、15天分析脉络膜的RALDH活性和RALDH2蛋白表达(“恢复”);对侧眼的脉络膜作为对照。
  • 使用多光子显微镜在鸡脉络膜整体中评估RALDH2+细胞的存在。
  • 通过蛋白是印记测量RALDH2蛋白表达,并通过atRA的HPLC定量评估RALDH2活性。
  • 通过BrdU标记结合RALDH2免疫组化在评估细胞增殖。
  • 为了表征RALDH2+细胞,在鸡(Ia 抗原、CD5、Col1-前肽、结蛋白、IgY、L-Cam、Cadherin1、MHC-II;Tcr-γδ、波形蛋白)和人类(α-平滑肌肌动蛋白、CD 31/34/68/146、结蛋白、IBA1、LYVE-1、PGP9.5、波形蛋白)供体组织中应用了各种组织特性异性标帜物的免疫组织化学染色,并进行共聚焦显微镜拍照。
  • 在鸡和人脉络膜中,具有不同形态的RALDH2+细胞存在于基质中并与脉络膜血管相邻。
  • 在雏鸡整体中,RALDH2+细胞向脉络膜毛细血管集中,与响应的对照组相比,它们的数量在恢复的1到7天几乎呈线性增加,并在7到15天之间趋于稳定。
  • 通过蛋白质印记和高效液相色谱法,在恢复4天后(↑107%和↑120%)分别观察到脉络膜RALDH2蛋白浓度和atRA合成活性显著增加。
  • 与对照组相比,在恢复4天后观察到RALDH2+/BrDU+细胞增加了3倍(恢复眼中所有RALDH2+细胞的12.43±0.73%,而对照组未4.46±0.63%, P < 0.001)
  • 在小鸡脉络膜中,对大多数RALDH2+细胞共同表达Col1前肽,但不与任何其他检测的抗体共同标记。
  • 在人类脉络膜中,一些,担不是所有的RALDH2+细胞与波形蛋白共定位,但对所有其他测试的抗体均为阴性。
  • RALDH2+细胞代表鸡和人类脉络膜中的一种新型细胞类型。
  • 研究者发现一些人类RALDH2+细胞对波形蛋白呈阳性,所有鸡RALDH2+细胞对Col1呈阳性,这表明RALDH2+细胞最接近血管周围和基质成纤维细胞。
  • 恢复4天后RALDH2+/BRDU+细胞数量增加表明脉络膜atRA浓度部分手RALDH2+细胞增殖控制。
  • 这种脉络膜细胞类型的鉴定将提供对负责调节出声眼部生长的细胞时间的更广泛的理解,并可能为治疗近视的特异性靶向策略提供新途径。